Et D-317 puma a scratch MG) et avec EGFRvIII transfecté de manière stable . De manière similaire, dans trois lignées de GBM exprimant EGFR, il a été démontré que PUMA co-immunoprécipitait avec EGFR (Fig. 1d). Les IgG n'ont pas donné de signaux indiquant une spécificité d'immunoprécipitation. L'interaction EGFR-PUMA a été confirmée par IP inverse en utilisant un anticorps PUMA (Un rapport précédent avait montré que l'EGFR pouvait exister dans le cytoplasme sous une forme libre non liée à la membrane.

Dans ce contexte, l'EGFR activé à la surface des cellules est endocyté et acheminé vers le RE où il s'associe à Sec61beta, un composant du translocon Sec61, puis est rétrotranslocé du RE au cytoplasme en tant que récepteur puma a scratch femme non lié à la membrane [37] . Nos résultats dans la Fig. S2 dans Données supplémentaires montrent que PUMA interagit principalement avec la protéine EGFR qui n'est pas associée aux membranes plasmiques.

Ensemble, ces résultats indiquent que l'EGFR puma alexander mcqueen et l'EGFRvIII coexpriment de manière paradoxale avec des protéines pro-apoptotiques et interagissent spécifiquement avec PUMA dans le GBM humain.En utilisant une cohorte de 101 gliomes et 12 tissus cérébraux normaux, nous avons examiné les taux d'EGFR / EGFRvIII et de PUMA via l'IHC. Les résultats indiquent une corrélation positive significative entre les niveaux d'expression de EGFR / EGFRvIII et de PUMA (p = 0,039). Comme le montre la figure 2a.

l'étendue de la co-expression de EGFR / puma amg EGFRvIII-PUMA est significativement plus élevée dans les gliomes malins de haut grade (20% chez les AA et 34,1% dans les GBM) que dans les gliomes de bas grade (6,3 à 7,7%). ) et des tissus cérébraux normaux (0%). L'analyse de régression indique en outre que l'EGFR seul, PUMA seul et la co-expression EGFR / PUMA sont en corrélation significative avec le degré de gliome.La figure 2b montre deux gliomes immunocolorés représentatifs dans lesquels un GBM.

Un gliome de grade II (panneau inférieur) se colorent négativement pour les deux protéines. L'anticorps utilisé dans l'IHC EGFR / EGFRvIII reconnaît un épitope C-terminal présent dans les récepteurs EGFR et EGFRvIII, et des coupes tumorales consécutives ont été utilisées dans ces études. Le degré élevé de co-expression de EGFR / EGFRvIII-PUMA dans puma beige des échantillons de GBM primaires est cohérent avec les observations de la figure 1 avec les lignées cellulaires de GBM.

Conformément aux résultats de la figure S1, il a été constaté qu'une sous-population de GBM exprimait PUMA, mais pas des niveaux substantiels d'EGFR / EGFRvIII.EGFR / EGFRvIII et PUMA co-expriment dans des échantillons primaires de GBM et l'étendue de la co-expression est significativement corrélée au degré de gliome. de manière significative avec PUMA dans les GBM primaires. Une cohorte de 101 gliomes et 12 tissus cérébraux normaux a été soumise à une coloration IHC pour EGFR / EGFRvIII et PUMA.